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高产抗病奶牛品系培育及应用

发布时间： 2023-10-29 浏览量：23

意向投入金额：
产业领域：其他
单位名称：哈尔滨完达山奶牛养殖有限公司
单位属性：企业
信息有效时间：
需求类别：
所在地区：哈尔滨市

需求详情REQUIREMENT DETAILS

联系人

刘军

联系电话

15244763624

邮箱

961953807@qq.com

项目简介

技术问题描述：以抗病、高产等重要经济性状为育种目标，解析性状形成的遗传基础与调控机制，发掘具有育种价值的关键基因或调控元件；建立高通量抗病可编辑基因筛选技术，开发牛全基因组选择遗传评估系统；构建分子设计、基因精准突变等新型育种技术体系，培育优质抗病高产奶牛新品系并产业化应用

-需要的技术成果及相关指标描述：将CD46基因SCR1区域的66EQIV69和82GQVLAL87基序分别进行点突变，探索CD46突变体与BVDV E2的结合能力，从而确定CD46结合BVDV E2的关键位点。进一步，构建靶向CD46基因的CRISPR/Cas9切割载体和CD46基因点突变同源重组打靶载体，对高产奶牛胎儿成纤维细胞进行基因编辑，筛选CD46基因点突变的阳性体细胞克隆。从牛卵巢中获得带有卵丘细胞的牛卵母细胞，将其在体外培养至成熟期。同时，作为细胞核供体的转基因细胞在体外培养至状态良好后，采用体细胞核移植技术将鉴定正确的核移植供体细胞注入去核的成熟卵母细胞中。在显微镜下观察克隆囊胚的发育情况，挑选正常发育的克隆囊胚进行后续胚胎移植。为了验证供核细胞为双等位基因打靶的阳性单克隆细胞，从构建的克隆胚胎中随机挑选一小部分进行PCR检测。诱导胚胎移植受体安格斯牛进入同期发情阶段，通过非手术法将发育正常的转基因克隆囊胚移植到受体母牛的子宫角内，2个月后记录受体母牛的妊娠情况，淘汰未受孕牛，保留受孕牛到产牛犊。进一步，将 4~5 月龄健康正常犊牛（BVDV 检测阴性）及通过体细胞核移植技术获得的抗病毒牛同时进行BVDV攻毒实验，比较它们的临床症状及体内病毒载量，确定抗病毒牛对BVDV的抵抗力。

-拟合作方式：合作开发-拟投入资金（万元）：1200

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