哮喘的本质是气道慢性炎症，并在此基础上出现气道高反应性和气道重塑。ATP是急慢性炎症过程中一个重要的调节器和危险信号，ATP介导的慢性气道炎症在哮喘发病中的作用日益受到重视。已有研究表明，ATP是嘌呤碱受体P2X4Rs的配体，ATP-P2X4Rs通路参与神经炎症时的免疫调节反应，且P2X4Rs在肺组织及免疫细胞中有表达。那么，ATP介导的P2X4Rs信号通路是否参与哮喘发病过程，以及其调节气道炎症及气道重塑的病理生理学机制，是本研究的主要目的与创新点。本研究成果补充和完善了支气管哮喘发病机制，为开辟哮喘治疗新途径提供了理论依据。 本项课题应用卵蛋白致敏及气道激发制作过敏性哮喘模型，应用形态学检测方法及分子生物学检测方法，证实了ATP介导的P2X4Rs信号通路参与哮喘发病过程，且可能通过参与肺动脉平滑肌细胞增殖及表型转化进而调节哮喘气道重塑。应用瑞氏-吉姆萨染色、免疫荧光及ELISA方法检测BALF上清中相关炎症因子的表达；通过特异性拮抗剂阻断P2X4R后，检测哮喘小鼠肺组织转录因子T-bet/GATA-3的表达是否发生变化；应用Western blot检测肺组织磷酸化p38MAPK、磷酸化ERK及NF-κB结合活性的变化情况；揭示了ATP-P2X4R通过调控相应的细胞炎症因子及趋化因子参与哮喘气道重塑，深入阐明了ATP-P2X4R通过调控Th1/Th2平衡失调参与哮喘发病，进而通过下游MAPK-NF-κB信号途径参与哮喘气道炎症和气道重塑的调节过程。此外，进行原代培养支气管平滑肌细胞，通过基因沉默等技术检测P2X4R在支气管平滑肌细胞结构重构中的作用。应用生物信息的方法筛选与P2X4R正相关度和负相关度高的LncRNA，为深入探索与P2X4R互作调控哮喘发病过程的长链RNA奠定基础。 综上所述，本研究明确了ATP介导的P2X4受体信号通路参与哮喘发病过程，阐明了ATP-P2X4受体信号通路通过调控Th1/Th2平衡失调参与哮喘气道炎症的发生，通过调控肺结构细胞分泌因子的释放参与哮喘气道重塑，进而从分子及信号转导水平揭示了哮喘发生的病理生理学及免疫学机制。本研究后续将进一步筛选与P2X4R互作调控哮喘发病过程的长链RNA，从基因水平为寻找哮喘治疗的新靶点提供理论依据。 该项研究成果于2014年10月24-27日在上海参加中国生理学会第24届全国会议代表大会暨生理学学术大会以壁报的方式展示交流。发表SCI收录论文1篇，修稿中1篇；发表中文核心期刊论文2篇。培养青年教师1名，培养硕士研究生2名，均已顺利毕业。

哈尔滨医科大学

该项目为储备库项目资源，暂无效益分析内容。