项目来源：2015年市级指导性科技计划项目 合同号：2015-s2d-40 本项目主要通过两个方面提高抗酸杆菌检出的阳性率，一方面通过细胞沉淀仪对脑脊液及胸腹水等无菌体液标本进行沉淀，将更多地 抗酸杆菌留到玻片上，在通过改良的抗酸染色方法对其进行抗酸染色，可以大大提高脑脊液及胸腹水等无菌体液中抗酸杆菌的检出率。 对于无菌体液，传统的制片方法主要是通过离心沉淀，然后留取沉渣进行涂片，但很多无菌体液经离心后根本看不到沉渣，因此只能大概地用所谓的沉渣进行涂片，造成这种方法收集到的菌量十分有限，因此直接造成了染色的阳性率极低，使其应用价值十分的有限。 而本项研究应用细胞沉淀仪法收集结核杆菌，可以将几毫升无菌体液中的结核杆菌全部留到玻片上，相对于传统的制片方法，结核杆菌的留取量大大提高。 传统的抗酸染色一般使用齐尼（Ziehl- Neelsen）抗酸染色法，以5% 石炭酸复红加温初染，使结核杆菌染色，加3%盐酸酒精使其他成分脱色，而抗酸杆菌不会脱色，再加用美蓝复染，则分枝杆菌呈红色，而其他细菌和背景中的物质为蓝色，而结核杆菌的细胞壁脂质含量较高，约占干重的60%，特别是有大量分枝菌酸包围在肽聚糖层的外面，可影响染料的穿入。在染色的过程中，还经常会出现标本脱落的情况。而改良的方法，首先对标本进行了固定，使标本不易脱落，还在染液中增加了0.3% Triton X-100，它可以溶解脂质，从而使结核杆菌和染料的结合率更高，将会大大提高染色的阳性率。本次研究将传统和改良的方法分别染色，传统的方法作为对照组，改良的方法作为实验组。探讨两种方法之间阳性率的差异。通过研究，改良的抗酸染色法联合细胞沉淀仪法确实可以大大提高无菌体液中结核杆菌的检出率，为临床早期诊断结核性疾病提供可靠依据。

大庆市人民医院

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