一、课题来源与背景 系统性红斑狼疮(Systemic Lupus Erythematosus，SLE)是一种病因没有明确，累及全身多器官、多系统的自身免疫性结缔组织病。炎症可累及全身，造成关节、皮肤、肾脏、心、肺、血管等各脏器及组织不可逆性慢性破坏和功能丧失，最终影响生命。然而，SLE的病因、发病机理尚不完全清楚，合适的动物模型有助于对其进行研究。近年来，环境因素的致病作用和机理正日益引起重视。因而，诱导性狼疮小鼠模型的建立有望揭示环境因素的致病机理。 二、研究目的与意义 系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus, SLE)是一种病程反复累及全身多系统、多器官的自身免疫性结缔组织病，且有一定的致死率，对其发病机制的研究是提高SLE诊断和治疗效果的重要前提。然而，SLE的病因、发病机理尚不完全清楚，合适的动物模型有助于对其进行研究。由于人类SLE的基本免疫学异常均可在SLE小鼠中见到，因此SLE小鼠作为动物模型，在阐明SLE的病因、发病机理，寻找新的治疗方法等方面发挥着重要作用。 SLE动物模型分为自发性模型和诱导性模型。自发性狼疮小鼠要求小鼠严格代传，侧重研究遗传因素对SLE发病的影响。诱导性狼疮小鼠模型是指应用诱导剂使小鼠出现类似人类SLE病变表现的动物模型，主要用于研究环境因素对SLE发病的影响。既往研究通过遗传性狼疮鼠模型的建立，从基因水平证实了遗传因素的致病性。近年来，环境因素的致病作用和机理正日益引起重视。因而，诱导性狼疮小鼠模型的建立日益成为研究的热点。 降植烷(Pristane)化学名是2,6,10,14-四甲基十五烷(2,6,10,14-tetramethylpentadecane, TMPD)。化学物质降植烷平常可存在于废油垃圾中，为细胞膜激活剂，与脂质双分子和细胞膜结合，在一定浓度下对细胞造成毒性。自从Satoh M等1995年发现给非自发性免疫鼠BALB/cByJ鼠一次性腹腔注射Pristane 0.5ml可成功诱导小鼠狼疮以来，该方法已成为诱导狼疮小鼠模型最常用方法。 大量研究表明，SLE患者体内产生的自身抗体主要针对凋亡细胞的表面抗原或核成分，提示凋亡细胞是体内自身抗原的主要来源。检测证实SLE动物模型诱导成功的标志包括：(1) ANA(抗核抗体，antinuclear antibody)阳性、抗dsDNA抗体[抗双链DNA(double stranded DNA)抗体]阳性；(2) 肾脏组织病理切片可见肾小管蛋白管型，小管上皮细胞增生，肾小球上皮细胞增生；(3) 直接免疫荧光染色可见肾小球毛细血管襻免疫复合物沉积，呈连续性荧光分布。其中，抗dsDNA抗体和ANA的出现是诊断狼疮性肾病的“金标准(golden marker)”。 因此，本课题拟采用降植烷诱导BALB/c小鼠，建立非自发性系统性红斑狼疮小鼠动物模型，为研究人类系统性红斑狼疮的病因、发病机理提供理论指导，同时研究BALB/c小鼠的ANA抗体、抗dsDNA抗体、BALB/c小鼠肾脏组织的变化情况，促进降植烷在诱导性红斑狼疮BALB/c小鼠动物模型领域的应用，并推动人类系统性红斑狼疮致病因素、发病机理的研究进程。 三、主要论点与论据 建立了pristane诱导的系统性红斑狼疮(SLE)小鼠模型，并对该小鼠的发病机制进行初步的探讨。将6~8周龄雌性BALB/c小鼠随机分为两组，实验组单次腹腔注射pristane0.5ml，对照组单次腹腔注射生理盐水0.5ml，注射前及注射后每月定期检测抗系统性红斑狼疮(SLE)抗体、抗双链DNA抗体，每2周检测尿蛋白量，6个月处死动物，观察肾脏HE染色及直接免疫荧光染色后镜下变化。实验发现，小鼠腹腔注射降植烷2个月后，其自身抗体(anti-dsDNA、anti-SLE)浓度明显高于对照组，且6个月内抗体浓度逐渐升高；6个月时，73%造模组小鼠出现++++尿蛋白；肾脏H&E切片显示造模组小鼠肾脏出现变肾小球肿胀，炎症细胞浸润等典型的肾病改，对照组小鼠肾脏组织未见病理改变；直接免疫荧光染色见造模组小鼠肾小球毛细血管存在免疫复合物沉积，对照组小鼠肾脏组织未见改变。研究结果表明，pristane成功诱导系统性红斑狼疮动物模型。 四、创见与创新 1、采用降植烷诱导BLAB/c小鼠，建造SLE动物模型是本项目的重点，也是本项目的特色。 2、通过评估发病小鼠肾脏损伤和检测自身抗体变化，来判断小鼠是否SLE发病，是国内该领域的难点，也是本项目的创新点。 五、社会经济效益、存在的问题 降植烷诱导的SLE模型对动物和实验条件的要求相对较低，制备方法简单，疾病发展时间较长，发病情况从临床、免疫学及病理方面与人类狼疮相似。探讨该模型的特点，对进一步研究其发病机制及其与人类SLE的相关性，推动人类系统性红斑狼疮致病因素、发病机理的研究进程具有一定的指导意义。 六、历年获奖情况 1、题为《降植烷诱导小鼠系统性红斑狼疮模型研究》的论文获第五届中国中药商品学术大会优秀论文二等奖一项； 2、《北方鲤体内典型渔药残留风险管控技术研究》获黑龙江省科学技术厅农业科技奖一等奖； 3、《北方鲤体内典型渔药残留风险管控技术研究》获黑龙江省科学技术奖三等奖。

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