甲状腺癌是内分泌系统最常见的肿瘤，手术治疗是目前的主要治疗方法，手术切除范围大，损伤重。但由于部分甲状腺癌在发病早期即合并淋巴结转移，而这种转移对肿瘤的复发率有明显影响。因此，近40年来，对甲状腺癌手术切除范围及术后是否进行放射碘治疗等问题一直存在争论。尤其是临床检查颈部淋巴结阴性的病例。但由于术前或术中经常未能发现和证实有无区域淋巴结转移，对手术方式选择造成困难。前哨淋巴结活检应用较好的解决了此问题。由于研究的进一步深入，又一个新问题摆在医学者的面前，即假阴性率的出现。所谓假阴性率即HE染色未发现SLN有肿瘤转移，而实际上淋巴结有肿瘤庄毅的情况，假阴性率是由微转移造成的。所谓“微转移”是指传统的组织形态检测淋巴结的一个切面而不能发现肿瘤的转移，一般认为微转移灶大小不超过0.2mm，淋巴结中转移的微量癌细胞仅靠传统的病理组织学有限的切片难以完成。如何寻求高效率的检测手段来指导治疗是肿瘤的一个研究重点。现目前已有多数单位相继展开不同方法的甲状腺癌的前哨淋巴结活检术（SLNB），SLNB能初步反应颈部淋巴结转移情况，一般SLN阴性提示该器官区域发生恶性肿瘤转移到别处的淋巴结可能性小。目前多采用亚甲蓝染色法，简单经济，无放射性污染，直视下定位，无不良反应。 SLNB虽可初步判定SLN的转移情况，但决定SLNB成功的两个主要参数是检出率和假阴性率，有大量样本随机研究显示：SLNB的假阴性率均为5-10%。淋巴结转移的微量癌细胞是造成假阴性率的主要原因，靠传统的病理学检查很难监测出来，因此会出现假阴性率，即未检测到前哨淋巴结转移，实际上已经发生肿瘤细胞转移。假阴性结果会导致错误的治疗方案，有可能发生严重的不良后果。Buchholz等提出更高的要求，认为最为理想的指标是检出率高于95%和假阴性率低于5%。所以，必须寻求更准确的检测方法。 本研究在HE染色的基础上，联合应用逆转录酶聚合酶连反应（reverse transcripasepolym erase chain reaction,PT-PCR），检测SLN中的角蛋白19（cytokine 19,CK19），本研究对这一技术的可行性，准确性等指标探讨其临床价值 ，评价其对诊断甲状腺癌SLN微转移的价值。 CK19是一个低分子量的角蛋白，广泛存在于上皮细胞和基底细胞中，过去一直认为高分子量的角蛋白对甲状腺病变中不同程度分化的上皮细胞具有鉴别作用。近年来随着CK19在甲状腺病变中的广泛研究，发现低分子量的角蛋白也同样具有鉴别不同程度分化的甲状腺上皮的作用。Shin等利用组织芯片和免疫组化技术研究发现，CK19在80.9%的甲状腺乳头状癌的有用标记。Park等认为CK19可区别乳头状癌和滤泡癌，Bonzanini等认为CK19和P56的强阳性表达有利于乳头状癌的细胞学诊断，黄悦等研究提示CK19阳性表达式是滤泡细胞增生恶变的重要标志，不但可作为甲状腺良，恶性病变，尤其是乳头状癌的重要依据。而且可以提示一些恶性病变倾向，防止漏诊。 PT-PCR扩增技术具有高灵敏度，高特异性，高精确度，高效率和污染小等特点，是当前检测淋巴结肿癌转移灶最灵敏的方法，近年来在临床上选择肿瘤特异的标志物进行淋巴结微转移灶的检测得到越来越多的应用，关键在于选取理想的肿瘤标志基因作为扩增对象。 CK19是上皮细胞骨架的组成部分，在正常淋巴结无表达，因此，在SLN中应用PT-PCR法检测到CK19则表明有甲状腺癌微转移。 将两者结合起来进行研究，本实验具有可行性，将对于甲状腺癌的诊断，治疗和预后提供了客观依据，是一种值得推荐的实验室诊断方法。 本研究应用RT-PCR方法检测甲状腺肿瘤组织中CK19mRNA的表达情况，结果表明，甲状腺癌和甲状腺良性肿瘤的CK19mRNA阳性率分别为95.0%，45.5%，两者的差异有统计学意义（P＜0.01），恶性肿瘤组CK19mRNA的表达率高于良性肿瘤组。在分析CK19mRNA表达的29例患者的定量数据中发现，恶性肿瘤组的CK19mRNA含量明显高于良性肿瘤组，两者的差异有统计学意义（P＜0.05）。 综上所诉，CK19mRNA在甲状腺肿瘤的表达为恶性肿瘤的标志，检测CK19mRNA是一种较准确反应组织良，恶性的方法，利用RT-PCT方法检测CK19在mRNA水平的表达，结合常规组织学检查，可以提高甲状腺恶性肿瘤的检出率，为进一步结合细针穿刺活检，提高术前诊断准确率提供依据。

牡丹江医学院红旗医院

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