目前关于白藜芦醇防治骨质疏松的探索多为基础研究，且多限于细胞或动物水平，而临床的应用及人体内的代谢研究却是甚少。在本研究中，白藜芦醇在动物及人的细胞水平研究显示有促进间充质干细胞成骨分化，抑制其成脂分化，且在卵巢切除小鼠的研究中显示白藜芦醇在防治骨质疏松中的雌激素样作用客改善小鼠骨密度、降低骨转换率、防治骨质流失等，本研究使白藜芦醇补充剂在骨质疏松临床上安全有效地应用提供参考。（1）离体实验观察白藜芦醇对BMSCs成骨/成脂分化的影响：为确定白藜芦醇是否在BMSCs成骨/成脂分化中发挥主要作用，我们向正常小鼠的BMSCs中给予白藜芦醇，48小时后，分别诱导各组BMSCs向成骨/成脂分化。成骨诱导14天后，应用ALP和ARS染色检测BMSCs矿化程度和钙盐沉积情况，应用qRT-PCR技术检测骨BMSCs中成骨分化相关基因（ALP、Collagen-I、BMP-4、Osteocalcin、Osteopontin）mRNA的表达，应用western blot和免疫荧光技术检测BMSCs中成骨分化相关蛋白（ALP、Collagen-I、BMP-4、Osteocalcin、Osteopontin）的表达，探究白藜芦醇对BMSCs成骨分化的影响。成脂诱导16天后，应用ORO染色检测BMSCs中脂肪油滴的形成情况，应用qRT-PCR技术检测BMSCs中成脂分化相关基因（PPARγ、CEBP/α、CEBP/β、CEBP/δ）mRNA的表达，应用western blot和免疫荧光技术检测BMSCs中成脂分化相关蛋白（PPARγ、CEBP/α、CEBP/β、CEBP/δ）的表达，探究白藜芦醇对BMSCs成脂分化的影响。（2）在体实验观察白藜芦醇对骨质疏松进程的影响：为了探究白藜芦醇对骨质疏松进程的影响，我们通过切除小鼠双侧卵巢构建雌激素缺乏诱导的骨质疏松模型（OVX组），对照组小鼠仅切除卵巢周围部分脂肪组织（SHAM组），给予白藜芦醇处理。四周后，应用μCT检测各组小鼠骨组织各项指标，确定白藜芦醇对骨质疏松进程的影响。（3）检测miR-296在雌激素缺乏诱导骨质疏松模型中的表达：为了探究白藜芦醇对BMSCs成骨/成脂分化转化和骨质疏松症中的作用机制，我们分离并提取各组小鼠的骨组织和BMSCs，检测骨组织和BMSCs中差异性表达的miRNAs，并检测白藜芦醇处理后差异性表达的miRNAs，前期实验我们筛选出miR-296；本项目探究白藜芦醇对BMSCs成骨/成脂分化及骨质疏松进程的影响，并探究其具体机制，为白藜芦醇防治骨质疏松症提供理论依据。

齐齐哈尔市第一医院

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