该项目是2016年市科技社会发展指令性计划项目。项目编号为SFGG-201622。该项目主要选择的对象是2016年6月至2016年12月结核医院收治的初治菌阴性肺结核患者，通过支气管镜检查，留取肺泡灌洗液，应用Xpert MTB/ RIF技术检测肺泡灌洗液。选择痰菌阴性或无痰拟诊的肺结核患者，签署知情同意书，应用奥林巴斯BFP60纤维支气管镜，选取病变累及的肺段作为灌洗部位，严格按照《纤维支气管镜临床应用指南》进行操作，使用一次性灌洗液回收装置，将50ml无菌生理盐水（370C左右）分2次经过纤支镜注入病变累及的叶段支气管，然后用负压吸引缓慢回收，把每例患者回收的肺泡灌洗液混匀后，均匀分成2份，立即送检，其中一份进行Xpert MTB/ RIF 检测，另一份进行涂片抗酸检测和培养及药敏试验。 严格按照 Gene Xpert MTB/ RIF 检测盒的检测程序进行操作。选取１ml标本加入处理管中，根据标本的形状加入２倍标本体积的样品试剂标本处理液，采用漩涡振荡15－30ｓ，然后静置15min。将检测盒打开，吸取２ml处理后的样品缓慢加入到检测盒中，再将检测盒放置在检测系统的检测模块中，将仪器打开，进行全自动检测，约２ｈ后反应结束后，在检测系统窗口下可直接读取测试结果。 另外，取一部分灌洗液涂片后抗酸染色镜检，另一部分采用固体培养基培养，具体操作根据《结核病实验室标准化操作》进行。采用４％氢氧化钠进行处理，通过无菌操作的方法将标本在改良罗氏培养基斜面上进行接种，在37℃的条件下分别培养３天和７天后进行观察，然后再每１周观察１次，对生长情况进行详细记录，直至培养至阳性结果出现，如果60天后无生长，则判断为阴性。在培养基上出现菌落时，进行生化实验菌种鉴定和药敏试验，培养阳性标本根据《结核病细菌学检验规程》进行，两组进行统计分析，最后得出结论：应用Xpert MTB/RIF技术检测支气管肺泡灌洗液，不仅阳性率高，更重要的是时间短，只需要2个小时，并且与TB培养检测法高度一致，即敏感性和特异性都很高，同时对RFP的耐药性进行快速检测，因此，对菌阴性肺结核的临床诊断具有重要价值。 本研究证实，Ｘｐert ＭＴＢ／ＲＩＦ检测试剂盒，能够对结核杆菌和利福平耐药相关的基因，能够对耐多药患者进行初筛，敏感性和特异度较高，检验周期也比较短，因而临床上可作为首选检测方法。本研究结果显示，以固体培养法作为金标准，Ｘｐert ＭＴＢ／ ＲＩＦ检测的敏感度为92.1％，特异度为91.7％，阳性预测值为97.2％，阴性预测值为78.6％，Ｋappa 值为0.81，这与大部分研究结果基本一致，提示Ｘｐert ＭＴＢ／ＲＩＦ检测和固体培养法具有极好的一致性，而且 Ｘｐert ＭＴＢ／ＲＩＦ 检测不但能够提高敏感度，而且能够缩短检测时间。 Ｘｐert ＭＴＢ／ＲＩＦ 检测和药敏试验具有较高的一致性。因为该研究报告所选病例为初治结核病人，只检测到1例对RFP耐药，以比例法药敏试验作验证，也完全符合RFP耐药。由于耐利福平分枝杆菌耐药基因主要集中在81bp的核心突变区，Ｘｐert ＭＴＢ／ＲＩＦ 主要是通过对rpoＢ基因片段核心突变区的检测对耐利福平结核病进行诊断，因而Ｘｐert ＭＴＢ／ＲＩＦ检测在结核分枝杆菌对利福平的耐药性的检测上也具有明显优势。 综上所述，气管镜灌洗液Ｘｐert ＭＴＢ／ＲＩＦ检测，是一种便捷、快速、准确，且能够对涂阴肺结核患者呼吸道标本直接进行分子生物学检测的方法，其敏感性和特异性都非常高，对菌阴性肺结核的诊断具有重要临床价值。

齐齐哈尔市结核病防治院

该项目为储备库项目资源，暂无效益分析内容。