糖尿病是一种常见的内分泌―代谢疾病，发病率呈逐年上升趋势，同时，随着近年来抗生素及免疫抑制剂的普遍应用和滥用，使真菌感染的发病率有明显增加趋势，且以白色念珠菌感染最为常见。为了提高糖尿病与真菌感染相关性的认识，以及白色念珠菌感染菌株及耐药趋势，本课题通过PCR方法对我院近二年来内分泌科糖尿病患者感染白色念珠菌临床分离株进行基因分型研究。 本课题利用白色念珠菌在25SrDNA编码区内存在一可转座I型内含子，内含子中至少存在三个插入片段：252、341、379 bp。通过PCR方法扩增白色念珠菌25S rDNA基因内含子区，以内含子大小及其中可转座I 型内含子片段的缺失或插入作为分型依据，可将白色念珠菌分为（A/B/C/D/E）五种基因型，同时采用染色体的172bp长的特征性重复序列（RPS）对白色念珠菌进行种内基因分型，可根据电泳结果分离六种亚型。 基因分型是以生物体DNA 序列的差异为基础建立的显示基因组多态性的方法。基于核酸的分子生物学方法(主要是PCR方法)是念珠菌诊断、分型的发展趋势。基因分型可以准确显示白色念珠菌间的相似性，从而判断其亲缘性的远近，并以此为基点探索一系列问题。分子分型技术已成为研究念珠菌病流行病学及合理选择药物的基础，形成了以PCR 技术为基础的一系列分子诊断方法，成为感染菌种(型) 的早期鉴定和指导前期治疗的有力工具。在今后白色念珠菌流行病学研究中基因分型将占主导地位， 本课题首次将白色念珠菌基因分型应用于糖尿病患者中，利用25SrDNA和ALT重复序列RPS设计引物扩增产物对糖尿病患者样本中白色念珠菌进行基因分型研究，将对于糖尿病患者白色念珠菌感染的诊断、治疗、流行病学监测，及根据基因分型针对药敏的敏感与耐药性相关性及临床疗效进行研究提供科学依据。且应用PCR技术进行基因分型具有快速、可靠、重复性好等优点，适合临床推广。

齐齐哈尔医学院附属第二医院

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