随着基因工程技术在农业生产中的广泛应用，越来越多具有改良特征的转基因植物在全球范围内得到广泛种植，仅2010年，全球29个国家的1540万农民种植了共1.48亿公顷的转基因作物。自1996年至2010年，全球转基因作物的种植面积增加了87倍。由于转基因植物体内的DNA分子被人为地修饰改造，遗传性状也发生了改变，其安全性成为人们关注的话题。为了消除转基因产品的安全隐患和消费者对转基因产品安全性方面的疑虑，世界许多国家对转基因产品的研究开发、生产销售及其在自然环境里的代谢降解等各个环节都制订了严格的法规条例，目前已有50 多个国家和地区实施转基因产品的标签制度。随着各国转基因标识制度的相继建立，对转基因检测技术的灵敏度和准确性提出了严格的要求，各种转基因检测技术也成为了研究热点，因此就迫切需要开发快速、准确、简便、高效的转基因生物检测技术和方法，以保证转基因植物及其产品标签制度顺利实施。 目前转基因小麦主要涉及品质改良、抗病、抗虫、抗逆、提高产量等，应用较多的为品质改良和抗病方面，而小麦面筋强度的优化是小麦品质改良的重要研究方向。本研究选取的转基因小麦品系为插入外源优质高分子量麦谷蛋白亚基基因1Dx5的转基因小麦，其特点是增加面筋的弹性，提高烘烤品质。 在现有国内外小麦品系材料中有一定比例的天然小麦中本身就含有一定数量的1Dx5优质谷蛋白亚基，在做转基因成分检测时可以检测到，因此就会出现假阳性现象，所以在转基因成分检测时筛选检测启动子，终止子等通用外源基因都是不够严谨的。由于高分子谷蛋白转基因小麦的复杂性，在转基因成分检测时需要同时检测多个外源基因，而品系特异性检测方法是通过检测外源插入载体与植物基因组的连接区序列实现的，由于每一个转基因植物品系，都具有特异的外源基因与植物基因组的连接区序列，并且连接区序列是单拷贝，所以品系特异性检测具有较高的特异性和准确性。品系特异性检测方法已经成为目前转基因检测研究的重点，并逐步地为国际各检测实验室所采用。 本课题的研究目的是获得的转基因小麦B73-6-1外源基因与小麦基因组边界序列，确定转基因小麦的精确拷贝数，建立具有高特异性、灵敏度、可靠性品系特异性定性、定量PCR检测体系。同时，根据建立的检测体系，起草转基因小麦B73-6-1检测标准，为准确、快速、高效的检测转基因小麦B73-6-1及其产品提供有力的技术支持，有助于对转基因小麦B73-6-1进行安全监管和检测具有重大的应用价值。 本课题组成员目前发表转基因检测方面研究论文十余篇，其中SCI检索2篇，ISTP检索1篇，共申请了4项专利。多个检测项目和任务的完成，保证了本课题组对转基因检测技术的熟练地掌握和良好地应用。 目前本课题组经过前期的分析和实验设计工作后，已经利用接头PCR法得到了p1Dx5质粒外源基因ubiquintin启动子与小麦基因组的边界序列，现阶段结果表明利用小麦基因组建库及接头PCR方法可以得到共转化质粒外源基因的5' 端和3' 端旁侧序列，为此课题的顺利完成提供了技术保障和前期的铺垫工作。 本课题建立的快速、标准、灵敏的转基因小麦B73-6-1品系特异性检测技术方法为转基因作物农产品安全评价提供快捷、准确的检测手段，可直接服务于转基因生物产品成分监督检验测试、出入境检验检疫、食品检验、环境监测、技术监督、育种等部门，用于对进出口农产品、食品中外源基因的检测。同时也为转基因作物的检测及安全性评价、转基因农产品的释放及其控制，提供准确、高效、经济的检测技术，具有长远的社会效益及潜在的经济效益。

东北农业大学

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