类风湿关节炎（Rheumatoid arthritis，RA）是一种以慢性侵蚀性关节炎为特征的全身性自身免疫病。类风湿关节炎的病变特点为滑膜炎，以及由此造成的关节软骨和骨质破坏，最终导致关节畸形 RA既属中医的痹症范畴,也属中医的络病范畴,其病机与络脉痹阻相关为"毒损肢节络脉、络道亢变、络脉虚滞",这与RA的"滑膜炎症-血管新生-损伤"的现代病机特点相似。现代研究认为RA络病的实质与滑膜血管新生有关。中医临床研究显示,具祛风胜湿、活血化瘀、虫类搜风等"通络开痹"功效的中药具有较好的抗RA滑膜血管新生作用。 光动力疗法(photodynamicTherapy,PDT)是指在有氧的情况下用适当波长的激光照射含有光敏剂的靶细胞,产生化学性质非常活泼的单态氧或其它活性氧物质,与靶细胞内的蛋白质、脂质、核酸等生物大分子发生作用,导致自身氧化,引起细胞损伤,进而导致组织破坏的一种治疗方法。1976年光动力疗法首次用于临床治疗恶性肿瘤,现己成为肿瘤综合治疗的方法之一。RA的炎性滑膜生长活跃、代谢旺盛、有生长相对无止境和具有侵袭性的特点,类似肿瘤组织。从理论上来说,PDT对消除RA增生的滑膜细胞应有一定的效果。 光动力疗法的核心是寻找合适的光敏剂，第一代光敏剂为血卟啉衍生物, 成分复杂, 化学结构不稳定,易受生物代谢因素的影响, 其光敏损伤作用的程度不易控制,因而影响PDT 的疗效。苯卟啉甲酸( BPD -MA)作为第二代光敏剂, 具有皮肤光毒反应轻, 潴留肿瘤组织时间长,而在正常组织很快代谢排出的特点, 广泛用于光动力疗法治疗肿瘤。近来研究表明, 很多传统药物也可作为光敏剂应用于PDT 治疗。因此,一种新观点认为, RA 的 PDT 治疗, 可以试验性地将可能的药物作为光敏剂。于是 Hendrich 等还分别用氯喹,氨甲喋呤, 炎痛喜康和鱼肝油酸钠作用于培养的病变滑膜细胞。结果显示, 氯喹和氨甲喋呤组, 经 351nm 激光照射后, 导致的细胞毒性至少增加 20 倍, 因此, 他们考虑上述二类药物可应用于光动力疗法治疗 RA，但此类研究报道不多。我国段丽凤等应用PDT 治疗胶原蛋白诱导的RA 大鼠右后足踝关节时，能选择性地杀死增生的滑膜细胞，减少血管翳的形成，也抑制了 RA 发病过程中细胞因子 IL-20 和 sTfR 水平的表达。同时在抑制炎性因子与杀伤增生滑膜细胞方面，PDT 治疗组表现出更好的优势。近年中药作为光敏剂已被证实，补骨脂、姜黄、黄柏、蚕砂均含有致光敏成分。李斌以蚕砂提取物叶绿酸e4作为光敏剂介导PDT，对膀胱癌细胞及大鼠膀胱原位癌均有杀伤作用。廖静研究黄柏在480 nm和650 nm光照下对癌细胞的光敏作用透射电镜发现:黄柏使实验组细胞线粒体、内质网广泛肿胀、扩张,细胞核糖体明显减少，提示黄柏对BGC823人胃癌细胞的确具有光敏抑制效应。徐敏源等应用蚕砂提取物作为光敏剂治疗小鼠移植瘤中应用电镜证实杀伤机理是致蚕砂提取物致光敏的瘤区微血管系统的严重破坏,导致瘤区血液循环的阻碍,而引起肿瘤细胞的缺血性死亡。中药因其毒副作用少，其应用前景更为广阔。 蚕砂,别名蚕矢,属虫类传统中药。蚕砂性温、味甘辛、人肝脾胃经,具有祛风除湿,和胃化浊,活血通络等功效。蚕砂的化学成分有叶绿素、类胡萝卜素、果胶、叶蛋白等，其提取物叶绿素具有很强光敏效应。结合蚕砂抗风湿和具有光敏特点，本研究应用蚕砂联合光动力治疗大鼠类风湿性关炎，探究大鼠类风湿性关节炎模型中关键因子的变化，分析其作用及机制，寻找新的抗类风湿性关节炎的方法并为临床应用提供理论支持，研究结果显示，蚕砂联合光动力能有效改善滑膜下炎症、滑膜增生、血管翳形成及骨软骨的破坏和病理情况，相应的保护骨和软骨，抑制炎症，预防滑膜增生。该次研究显示，蚕砂联合光动力组滑膜下炎症、滑膜增生、血管翳形成及软骨损害较轻。证实蚕砂联合光动力能保护骨和软骨，减轻炎症，预防滑膜增生。 相关研究显示，蚕砂联合光动力能有效降低VCGF、MMP-3、血清IL-1和TNF-α水平，升高SOD、TGF-β水平，自由基得到清除，对类风湿关节炎起到保护作用。[9-10]。本次研究也提示蚕砂联合光动力能通过激活SOD活性，上调TGF-β水平，下调关节滑液VCGF、MMP-3、血清IL-1和TNF-α，加快组织自由基清除，缓解炎症反应，抑制血管翳形成，保护类风湿关节大鼠关节及滑膜，改善功能。 综上所述，蚕砂联合光动力对类风湿性关节炎大鼠能够破坏血管翳、保护骨与软骨、缓解炎症反应、有望为临床提供新的干预方法。 目前尚存在问题：(1)大鼠造模成功率偏低；(2)蚕砂灌胃由于大鼠呕吐剂量相对差异，可能对结果产生影响。在项目实施过程中已通过挑选健壮大鼠及排除全身炎症重的大鼠，以提高造模大鼠成活率，以及提高操作者技术水平等方法进行了相应的解决。 此外，由于项目实施周期相对较短，项目进行的测试项目以及采集的样本数都相对较少，因此申请者会在接下来的工作中，增加测试种类并提高样本数，进一步的分析光动力结合蚕砂对大鼠类风湿关节炎的作用机制，为临床实验奠定基础。

哈尔滨市第四医院

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