本研究中MDS细胞株Mutz-1经DNA去甲基化药物地西他滨（DAC）处理后，MDS相关基因SF3B1、SRSF2和EZH2表达无显著变化，但U2AF1基因表达在1μM 和5μM 的DAC处理后分别为处理前的0.71和0.48倍。正常来说，基因启动子区5mC水平升高伴随基因表达降低，但Mutz-1细胞经DAC处理后U2AF1基因启动子区5mC水平也降低，1μM 和5μM 的DAC处理后5mC水平分别为处理前的0.91和0.79倍。 为了验证荧光定量PCR检测5mC水平的稳定性，我们同时采用亚硫酸氢盐处理结合PCR产物克隆测序法进行5mC水平检测，结果表明DAC处理前后U2AF1基因启动子区5mC水平分别为71.7%和53.3%，两方法结果一致。基于5mC和5hmC的相互转化关系，我们检测了DAC处理后Mutz-1细胞中U2AF1基因的5hmC水平，结果表明DAC处理后其5hmC水平显著性降低，并且呈剂量依赖性，1μM 和5μM 的DAC处理后5hmC水平分别为处理前的0.57和0.43倍。由此可见，5hmC可能调控U2AF1的表达而非5mC。 由于IDH1,IDH2,TET1和TET2在5mC转化为5hmC的过程中均起到重要调控作用，我们检测了DAC处理前后Mutz-1细胞中这四个基因的表达情况，结果表明IDH1, TET1和TET2表达在DAC处理后虽有所降低但差异不显著，但IDH2基因表达在DAC处理后显著性升高。 为了验证MDS患者标本中是否如MDS细胞株中所示为IDH2调控U2AF1基因的5hmC水平进而调控其表达，我们检测了IDH2基因突变和未突变的MDS患者中U2AF1基因的表达、5mC和5hmC水平。结果表明IDH2突变的MDS患者中IDH2表达仅为未突变MDS患者的0.82倍，U2AF1基因表达和5hmC水平均显著性降低，而其5mC水平无明显差异。与野生型患者相比，U2AF1基因突变的患者其U2AF1表达和5hmC均显著性降低，而其5mC变化无明显差异。这些结果表明IDH2参与了U2AF1基因的5hmC调控。

哈尔滨市第一医院

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