目的：冠心病（CHD）是最常见的心血管疾病之一，患病率呈持续上升趋势，其防治已成为全球的重大公共卫生问题。动脉粥样硬化（AS）则是引起CHD发生的最主要原因，也是重要的病理过程。近年来的研究已表明，长链非编码RNA（lncRNA）可参与AS发生和发展。本课题拟采用lncRNA表达谱芯片检测CHD患者和非CHD健康人外周血中lncRNA表达量，筛选出与AS相关的lncRNA，进一步探讨其在血管平滑肌细胞（VSMC）凋亡和增值中的作用，为AS机制的深入研究奠定基础。 方法：1.使用lncRNA表达谱芯片检测、比较冠心病与非冠心病健康人外周血中lncRNA表达量的差异。2.采用病例-对照研究分析lincRNA-p21与临床病理特征的关系。3.通过细胞转染和动物模型、MTT实验、多种染色法实验和流式细胞仪探讨和分析lincRNA-p21对VSMC增殖和凋亡的影响。4.应用GO富集分析、KEGG通路数据库、mRNA表达谱芯片和在线预测软件catRAPID分析、筛选与AS相关的通路。5.应用荧光素酶报告基因检测法、Westen blot实验分析、探讨lincRNA-p21与JAK2/STAT3通路之间的关系。 结果：1.冠心病患者和非冠心病健康人外周血中，lincRNA-p21、lncRNA-TUG1、lncRAN-HIF1A-AS1和lncRAN-ANRIL的表达量存在显著差异，其中，lincRNA-p21的差异最为显著。2.AS患者外周血中lincRNA-p21表达量显著低于对照者外周血中的表达量；且患有高血压和糖尿病的患者中，lincRNA-p21表达量显著降低。3.LincRNA-p21可以抑制VSMC增殖、促进凋亡。4.LincRNA-p21通过调控p21和p53影响VSMC增殖和凋亡。5.LincRNA-p21可与STAT3直接结合，参与JAK2/STAT3信号通路的激活，调节VSMC增殖和凋亡。 结论：1.LncRNA芯片检测和RT-PCR验证结果可见：lincRNA-p21、TUG1、HIF1A-AS1和ANRIL等4种lncRNA在冠心病与健康对照中存在显著差异。其中，lincRNA-p21的表达量差异最为显著。2.下调lincRNA-p21表达可抑制血管平滑肌细胞的增殖，并促进其凋亡，提示lincRNA-p21可能参与动脉粥样硬化的进程。3.LincRNA-p21通过调控靶基因STAT3的表达，使其下游的通路失活而促进VSMC增殖及凋亡，因此，AS中可能存在lincRNA-p21-STAT3-JAK2/STAT3轴的调控途径，通过影响VSMC的增殖和凋亡而促进AS的发生和发展，为临床上防治AS提供新的思路本研究是首次探索lincRNA-p21/JAK2/STAT3轴在动脉粥样硬化进展中的作用的研究。我们已经证实，在VSMC中，lincRNA-p21可以与STAT3结合，然后通过JAK2/STAT3途径发挥生物学功能，进而参与动脉粥样硬化的发展。但是，lincRNA-p21是如何从基因水平调节JAK2/STAT3途径的表达，仍然不明确。更进一步的研究，我们将通过染色质免疫沉淀和RNA结合蛋白的免疫沉淀反应来阐明调控机制，希望为日后的临床应用奠定基础。

哈尔滨医科大学附属第四医院

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