“无酶核酸分子线路”在不需要任何蛋白酶辅助的条件下，可以实现对单个或是多个单链DNA检测信号的放大效果。其中“催化发卡型结构自组装”以其设计方法简单，信噪比高，多种可选择的信号输出方式，成为近年来分析诊断的研究热点。将其与目前最具即时诊断兼容性的恒温基因扩增检测相结合，建立“恒温扩增-核酸分子线路”联用基因检测；可成功实现对当下多种传染病原的精准、实时、逻辑和多元诊断，有效消除延阻恒温扩增深入临床的频发性“误诊”和“信噪比不足”。通过“酶扩增的超级放大”与“无酶CHA的智能特异”高效融合，进而成功弥补其各自在序列选择性和灵敏度上的重大缺陷，将二者同时推向真正意义的实际应用。我们首次提出“LAMP与CHA串联”的联用型基因检测新技术（简称LAMP-CHA），并对该联用技术的可行性、必要性和技术优势进行初步验证和评估。随后，通过设计一系列创新性中转探针设计，对该联用技术的普适性、可靠性和智能性进行系统优化和提升，在分子层面，建立完全有望灵活满足各种临床需求的基因检测新原理。最终，我们一系列检测原理可以灵活的连接包括荧光光谱仪，电化学工作站，以及商品化POCT血糖仪等多种信号仪器，有望满足不同层面的检测需求，为开发便携式基因检测平台和器件奠定了原理基础 本项目中，我们通过设计简单的“三通型”结构，有效地将等温扩增反应与特异性的CHA信号放大组装集成在一起。这种设计基于空间组合形成的远程中转策略，可增加对于等温扩增产物检测的便捷性和特异性，可以区分等位基因的单碱基错配。该法最为显着的优点是它可以通过单一的信号探针、通过单一的3W-CHA反应实现多重目标基因的多元分析。因此，3W-CHA反应可以被视为核酸检测最有利的辅助工具，并且可通过优化应用于现实生活中的疾病诊断。

哈尔滨中科赛恩斯生物技术有限公司

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