利用多功能胎盘组织处理装置提取胎盘中造血干细胞的方法
发布时间: 2023-12-08 浏览量:16
- 交易方式:面议
- 联系电话:13936430608
- 单位名称或姓名:牛春玮
- 产业领域:高端装备
- 成果类型:
项目基本情况Basic information of the project
胎盘中造血干细胞含量丰富,是脐带血中的3-5倍,因此可以作为血液性疾病和免疫性疾病治疗中的主要造血干细胞来源。胎盘组织剪碎后进行分离、培养、扩增后,获得的间充质干细胞其研究应用领域已经包括多种于组织损伤修复,例如肝硬化、软骨损伤、神经损伤、骨损伤、肌腱韧带损伤、皮肤损伤等,是机体再生修复的重要干细胞来源。
干细胞从胎盘组织中获得,需要对胎盘组织进行各种处理,包括冲洗、消毒、组织剪小、造血干细胞收集、间充质干细胞培养等步骤。传统的方法是采用开放式操作方法,将胎盘组织放于一个无菌盘子中,在安全柜中,依次采用无菌水冲洗、移除、75%酒精浸泡消毒后移除、无菌水再次冲洗、组织手工剪刀剪碎、无菌水浸泡分离血液细胞等预处理过程,每一个过程都是开放过程,微生物污染风险非常大。同时此过程需要人工耗时高,所用器械也需要反复清洗、灭菌,因此成本高。
本技术是要解决常规胎盘细胞清洗、分离时胎盘组织开放处理容易污染,处理过程中人工耗时,处理不完全、组织间隙细胞获得少的问题,而提供利用多功能胎盘组织处理装置提取胎盘中造血干细胞的方法。
本项目的创新性是(1)采用自动化剪切方式,可以完全解决原有技术的缺点;(2)本项目技术一种多功能胎盘组织处理装置采用轴向转动和不同步上下翻动的电动混合方式,有利于清洗液与样本、消毒液与样本、收集液与样本的重复接触,实现高效的清洗和细胞回收功能。(3)本方法一次性可以获得富含造血干细胞/前体细胞的单细胞悬液,同时分离出可以直接用于贴壁法培养的富含间充质干细胞的组织块,操作简便;(4)本项目技术处理装置结构简单,造价低廉,使用后清洗方便,内有挡板可以实现组织和液体的重复接触,且处理器筒体、锥形处理液接收器和锥形收集液接收器均为半透明环氧树脂材料,不仅方便观察容器内胎盘清洗消毒过程和剪碎程度,重复使用前可在121℃条件下高压灭菌避免微生物污染;(5)本项目技术方法可有效提高有核细胞收获总量,当单次处理胎盘的体积为500mL时,单次有核细胞收获总量为(1-2)×1010个的比例达到13%以上,有核细胞收获总量(2-5)×1010个的比例达到28%以上,有核细胞收获总量>5×1010个的比例达到57%以上,CD34阳性造血干细胞数量均值达3.2×108以上;常规方法有核细胞收获总量范围为(2~4)×109个,CD34阳性造血干细胞数量最多为2.8×107个,所以本项目技术采用柔和的自动化切碎胎盘组织、收集液和胎盘组织在特定皮带转动方式下充分接触,解决了组织间隙细胞获得少的问题;(6)由于柔和的切碎过程以及处理时间的缩短,通过本方法可有效提高有核细胞活率和CD34阳性细胞占比,当单次处理胎盘的体积为500mL时(P<0.01),本项目技术与常规方法比较细胞活率平均上升7%,证明本项目技术对细胞的损伤小;本技术CD34阳性细胞占比达到0.54%以上,较常规方法比较CD34阳性细胞占比上升90%以上;(7)本方法可有效降低微生物阳性率,当单次处理胎盘的体积为500mL时,常规方法微生物阳性率达到28%以上,而本项目技术微生物阳性率仅为4.5%左右,下降趋势明显;(8)通过细胞克隆形成能力对比(集落形成数量),常规方法对比存在显著优势(P<0.05); (9)大大缩短了胎盘中有核细胞分离的时间,采用本技术后,平均处理时间为40min,常规方法平均处理时间为90分钟。节约的时间主要来自自动切碎胎盘、多个清洗过程的自动化操作(P<0.01)。
管理团队与技术团队Management team and technical team
天晴干细胞股份有限公司
效益分析Benefit analysis
该项目为储备库项目资源,暂无效益分析内容。
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