课题来源：本项目属于自选项目。是科研人员提出经黑龙江省农业科学院克山分院批准自行研究的项目。 项目背景：在世界上一些发达的国家：英国、美国、荷兰等国家早已研究出马铃薯病毒检测的试纸条，并已经进行了工厂化生产，已广泛的应用于马铃薯的科研和生产。在中国的医学检验和动物疫病的检验中有试纸条的应用；在烟草、南瓜、莴苣、黄瓜、番茄、葫芦科等植物的病毒检验中有试纸条的应用，但在马铃薯作物中还没有田间快速检测试纸条的应用。有中国检验检疫科学研究院动植物检疫研究所对检测马铃薯X.Y 病毒的胶体金免疫层析试纸条进行了研究的报道，但在中国的马铃薯的科研和生产中并没有马铃薯病毒田间快速检测试纸条的广泛应用。目前，检测马铃薯病毒的常规方法存在一些不足： 1）只能在实验室专业的技术人员通过专门的仪器来完成，操作过程繁琐，要求具体实验人员具备很高的技术水平。2）实验过程长，每个过程需要1.5-2天。3）不能现场取样，现场出结果。 常规的检测技术操作过程繁琐、实验时间长等不足，新的技术可以解决这些不足。为了提高克山分院检测水平，为了将检测手段广泛的应用到马铃薯的生产者中，克山分院进行了马铃薯病毒病快速检测试纸条的制备技术研究。 技术原理： 这种新的检测技术是利用免疫层析技术（immuno-chromatographic technology）、利用胶体金颗粒标记抗体、利用硝酸纤维素膜的毛细作用,使待测物(抗原/抗体)沿膜表面向前运动,与检测区标记的捕获物特异结合而聚集显色. 性能指标： 研究出马铃薯病毒病快速检测试纸条制备技术，制备出可以应用于马铃薯病毒检测的快速试纸条；将试纸条应用到3家企业的马铃薯脱毒种薯生产的病毒检测中。发表相关论文1-2篇。 技术的创造性与先进性： 1）方便、适用性广：无需实验室、无需专业人员操作培训、田间地头、马铃薯贮藏窖、海关等任何有马铃薯的地方均可测试；每个马铃薯种植者均能使用。 2）快速：3-4分钟出结果（以前的方法2天出结果）。 3）灵敏：一片叶子样品即可用于检测，采样量：0.2g 或2.0cm见方的叶子。样品的最低浓度为1ng/ml时可通过该检测试纸条检测出来。 4）准确性高：用检测X病毒的试纸条检测一批样品，再用双抗体夹心酶联免疫吸附实验法对同一批样品进行检测，两种检测方法的检测结果完全一致，符合率达100%。足以说明快速检测试纸条的准确性高。 5）特异性强：用检测X病毒的试纸条去检测其他的病毒、健康植株、缓冲液仅质控线出现紫红色，T线未出现紫红色，结果是阴性，因此本试纸条具有特异性。 6）稳定性强：将试纸条放在内放干燥剂的密封铝箔袋中，室温和37 ℃下保存长时间后颜色稍微减弱，其他不同温度、不同时间的测试结果无明显变化，说明在适当条件下保存，本试纸条具有较好的稳定性。 先进性：该技术已通过鉴定委员会鉴定，并被鉴定为该技术以达到国内领先水平。 技术的成熟程度，适用范围和安全性：马铃薯种薯生产、抗病育种、种植资源创新利用都需要种苗、种薯的检测，该项技术具有实用性。近两年已经用该项技术检测出很多的优质的马铃薯，该项技术是可靠的并具有成熟性。 应用情况及存在问题：该成果已应用到3家马铃薯薯业公司。本项目在研究阶段所用的制备马铃薯病毒检测线和质控线的NC膜是美国生产的，质量是最好的，目前价格也是最高的。 试纸条的制备时每个技术环节对环境净化级别的要求很高；金标试剂的配制、点膜、干燥、切割等环节，至少应在100000净化环境中进行操作。抗体等制备的操作至少在300000净化环境中进行操作。我们的实验室的环境达不到该净化级别。 试纸条的制备时每个技术环节对环境的湿度要求不一致。制作金标时环境湿度应在40-60%，试纸条组装时环境湿度应在30%以下；该实验室配置的除湿机小，环境的湿度达不到要求。 历年获奖情况：<马铃薯病毒检测技术研究>获齐齐哈尔市科技进步一等奖；<马铃薯病毒检测技术的研究》获黑龙江省科技进步三等奖。

黑龙江省农业科学院克山分院

该项目为储备库项目资源，暂无效益分析内容。