本项目针对牛精子冷冻保存的传统卵黄、脱脂乳等动物源性稀释液,存在对受体母牛群生物安全性问题。多种牛站超低温冷冻保存牛精子的稀释液一般都是购买昂贵的进口无动物源性稀释液进行牛精子冷冻生产的背景下提出的。 二、研究目的与意义 研制开发一种价格低廉、无抗生素添加、生物安全性高,并且浓缩保质期1年以上无动物源性稀释液性专利产品所以,很多种牛站超低温冷冻保存牛精子的稀释液一般都是购买昂贵的进口无动物源性稀释液进行牛精子冷冻生产的背景下提出的。减少进口无动物源稀释液的使用对我国奶肉牛养殖具有重要的意义。 三、主要论点与论据 （一）不同牛精子稀释液配方比较研究 该实验得出传统优势配方： 三羟甲基氨基甲烷24.224g 、柠檬酸13.536g、葡萄糖11g、卵黄200ml、蒸馏水 690ml、甘油60ml、青霉素160 万单位、链霉素100万单位。 （二）提高奶牛细管冻精精子活力的试验研究 牛细管冻精最佳熏蒸距离为2.5cm,时间影响不显著5-10min均可;前2min不要盖盖,以便液氮蒸汽散去,保证精子快速降到110-120℃,迅速度过冰晶;用50℃温水15s解冻精子的活力比其他温度和时间活力要好。 （三）不同缓冲液添加大豆蛋白冷冻奶牛精子试验效果研究 该实验得出大豆蛋白Tris稀释液的在显微镜下观察视野要比卵黄Tris稀释液清晰,蛋白Tris稀释液在冷冻实验和存活实验效果最佳,大豆蛋白Tris稀释液可以卵黄Tris稀释液。 应用无动物源性植物蛋白粉替代传统卵黄或脱脂乳等动物源性成份。稀释液浓缩不添加抗生素,避免抗生素乱用。（四）Tris-柠檬酸添加不同植物蛋白粉冷冻奶牛精子实验研究 Tris-柠檬酸大豆蛋白、Tris-柠檬酸花生蛋白、Tris-柠檬酸大豆花生混合蛋白和Tris-柠檬酸卵黄冻精稀释液保存精子在第4天仍能到达国家标准（0.3）精子活力,Tris-柠檬酸大豆花生混合蛋白稀释液存活的活力最佳。大豆蛋白、花生蛋白和两种混合蛋白植物源稀释液可以替代动物源稀释液。 （五）解冻牛细管冻精不同保存温度及时间对精子品质影响的检测研究 解冻无动物源稀释液超低温冷冻的精子,在室温保存2小时精子活力差异不显著,2小时后差异显著;解冻后精子在冰水混合物里保存4小时活力和细菌数差异不显著,4小时后细菌数增多,活力下降,差异显著,细菌数量都小于国标800 个。成果指标 （1）发表论文5篇,比实际指标超额完成4篇。 （2）发明专利1项 四、创见与创新 （一） 课题研究的创新点：应用无动物源性植物蛋白粉替代传统卵黄或脱脂乳等动物源性成份。稀释液浓缩不添加抗生素,避免抗生素乱用。研发廉价的浓缩保质期 1 年以上冻精稀释液专利产品。 课题研究的查新点：超低温保存牛冻精无动物源成份稀释液的研究是将大豆蛋白粉、花生蛋白粉、豌豆蛋白粉及小麦蛋白粉混合到Tris-柠檬酸缓冲液中,经超声波乳化配制而成浓缩无动物源成份的牛冻精稀释液。 五、社会经济效益,存在的问题 黑龙江省垦区有36.8万头奶牛,每年至少需要300万剂细管冻精,每剂0.25ml。研发廉价的浓缩保质期 1 年以上冻精稀释液专利产品， 国内领先水平。在垦区就能创收创收7万元/年;全国有1241.8万头奶牛,全国创收217.315万元/年,另外还可以扩展研发到其他动物,如鹿、鹿、狗、狼、狐狸、大鹅等市场前景广大,有良好的发展趋势。

黑龙江省农垦科学院

该项目为储备库项目资源，暂无效益分析内容。