“产气荚膜梭菌重组植物乳酸杆菌口服活菌疫苗的研制”是2017年由黑龙江省兽医科学研究所申请、齐齐哈尔市科技局下达的科技攻关项目。 坏死性肠炎是在1961年英国首次发现的一种禽类肠道疾病，A型产气荚膜梭菌是坏死性肠炎的主要致病原，其次为C型。禽类坏死性肠炎表现为一种急性或慢性的肠毒血症，以出现生长率降低、肠道损伤和死亡为特征。 随着近年来养禽业中禁止使用抗菌素，坏死性肠炎的发病率呈上升趋势，给国内外养禽业带来了重大经济损失，所以对于坏死性肠炎的诊断和治疗变得尤为重要。禽类的坏死性肠炎是由于产气荚膜梭菌引起的一种发病急，死亡快，死亡率高的传染性疾病，由于目前还没有十分有效的治疗方法，所以预防接种是减少本病发生的必要途径。 研究在禽坏死性肠炎高发季节对产气荚膜梭菌进行了分离，分离到了3株产气荚膜梭菌，然后利用植物乳酸杆菌NC8作为载体呈递产气荚膜梭菌两个关键基因plc和NetB分别制备疫苗并进行免疫及攻菌保护试验。通过ELISA检测抗体动态变化、雏鸡体重变化、免疫器官发育情况、免疫后肠道分离重组菌、病理组织学检查疫苗对雏鸡组织器官有无损害作用及保护作用、攻菌后细菌分离计数和剖检肠道病变评分来整体评价疫苗的免疫水平。 项目制备的产气荚膜梭菌plc和NetB毒素基因重组植物乳酸杆菌，经动物免疫试验、攻菌保护实验及临床效果试验，表明我们构建的重组植物乳杆菌能够在鸡肠道良好定植并减少产气荚膜梭菌在鸡肠道的定植，从而减轻肠道损伤，降低鸡只的腹泻率，促进鸡只增重，对产气荚膜梭菌感染而引起的坏死性肠炎有良好保护作用。本项目研究的技术在试验、试制过程中不断得到完善和提高，其基本趋于成熟。 经过三年的实施，项目在试验研究、产品研制、临床试验等方面都取得了较好的成绩，圆满地完成了工作任务，达到了预期效果。项目的实施可以降低禽类坏死性肠炎的发病率，从避免由于坏死性肠炎治疗而产生的抗生素的滥用。当前社会，人们对食品安全问题越来越重视，所以畜禽产品的药物残留问题备受关注，所以本项目的实施对维护社会稳定，对社会的发展具有重要意义。本技术在养禽业较发达的地区进行了推广应用，共应用15万只鸡，坏死性肠炎发病减少3万只，创经济效益90万元。 项目实施期间共发表论文7篇，其中核心文章6篇，会议论文1篇；获授权国家发明专利1项。

黑龙江省兽医科学研究所

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