① 课题来源与背景； "鸭瘟病毒分子生物学快速检测方法的建立及比较"是2016年7月由齐齐哈尔市科技局下达，黑龙江省兽医科学研究所承担的攻关项目（NYGG-201607），经过两年的工作，课题在试验研究、样品检测、推广应用等方面都取得了较好的成绩，圆满地完成了合同规定的任务和各项技术指标，达到了预期效果。 ②研究目的与意义； 鸭瘟是由鸭瘟病毒 (Duck plague virus，DPV ) 引起鸭、鹅和天鹅等水禽的一种急性败血性传染病。近年来鹅的鸭瘟广泛流行，对鸭的致病力减弱，对鹅的致病力增强，用鸭瘟疫苗预防收效甚微对水禽业发展危害极大。 本研究建立的针对鸭瘟病毒环介导等温扩增（LAMP）和交叉引物恒温检测方法具有快速、灵敏、特异、稳定、操作简便和结果判定简便等特点，能够对鸭瘟病毒进行快速检测。 ③主要论点与论据； 目前鸭瘟病毒检测的方法有很多，病毒分离、间接ELISA诊断方法、多聚酶链式反应（PCR）、实时荧光定量TaqMan-PCR等。血清学检测方法比较费时、费力；PCR方法对仪器要求又很高，在应用上都有一定的局限。LAMP和CPA有常规 PCR 方法无可比拟的优势：LAMP和CPA的整个扩增过程均在恒温条件下进行，规避了常规 PCR 对于温度升降的步骤，不仅不要使用昂贵的仪器设备，同时也大大缩短了反应时间，更加符合基层兽医站和临床一线对快速诊断的需要。鸭瘟病原学诊断, 为及时有效地防治鸭瘟病，选择特异性治疗方法提供科学的依据；是稳定养殖户情绪，将损害降到最低限度的保证。 ④创见与创新； 参照GenBank中鸭瘟病毒序列，针对鸭瘟病毒基因的保守区UL6靶基因的6个不同的区域，设计了环介导等温扩增引物和交叉引物恒温扩增引物。建立了新的特异、灵敏、稳定、操作简单方便的检测鸭瘟病毒可视化环介导等温扩增检测方法和交叉引物恒温扩增方法。建立的扩增方法均在恒温条件下进行，规避了常规 PCR 对于温度升降的步骤，不仅不要使用昂贵的仪器设备，同时也大大缩短了反应时间，更加符合基层兽医站和临床一线对快速诊断的需要。 ⑤社会经济效益，存在的问题； 课题实施期间，"鸭瘟病毒分子生物学快速检测方法的建立及比较"在4个县（市）种鸭场进行临床检测共有4.02万只疑似鸭瘟的发病鸭应用检测，对3.709只鸭瘟病鸭进行了早期诊断和治疗，创经济效益近37.09万元，该研究检测方法得到用户的广泛好评。自2016年黑龙江省兽医科学研究所"鸭瘟病毒分子生物学快速检测方法的建立及比较"课题组在部分养鸭户中应用研究方法检测鸭瘟病，该方法操作简便、灵敏、快捷能够在第一时间对疑似鸭瘟的发病鸭进行鸭瘟病的快速鉴别诊断，为养殖户节省了时间，减少了不必要的诊疗费用，并使鸭瘟病得到了有效防控。激发了养鸭积极性。促进了养鸭业的发展，增加了养鸭量，加快农村产业结构调整的步伐。实现了可观的经济效益和社会效益。 鸭瘟病毒可视化环介导等温扩增检测方法和交叉引物恒温扩增方法,扩增产物不能够进行测序，克隆和表达，它最大的用途就是用于病原微生物的快速检测。 ⑥历年获奖情况； "寒区肉牛健康养殖环境控制配套技术的研究"获省科技进步二等奖,证书号[2014]-10-09。"鸭瘟病毒环介导等温扩增（LAMP）快速检测方法的建立"获市科技进步三等奖，证书号2016-60-01。"小鹅瘟病毒环介导等温扩增（LAMP）快速检测方法的建立"获省畜牧科技进步三等奖，证书号[2013]-21-08。"寒区肉牛舍环境控制技术的研究"获省畜牧丰收奖一等奖，证书号HMF[2013]-10-12。 "肉牛健康养殖环境控制技术的应用"获省畜牧丰收一等奖,证书号HMF[2014]-09-04。 "寒区肉牛健康养殖环境控制配套技术的应用"获省科技进步奖励三等奖，证书号2015-197-05。"东北寒区标准化肉牛舍设计参数的研究"获市科技进步一等奖，证书号2016-08-05。 "奶牛乳头液体保护膜产业化生产技术的研究"获市科技进步三等奖，证书号2016-61-06。"齐市地区羊胃肠道线虫对伊维菌素耐药性的研究"获省畜牧科技进步三等奖，证书号[2016]-23-07。"鹅和番鸭细小病毒ELISA试剂盒的研制"获省畜牧科技进步三等奖，证书号[2016]-21-03。"奶牛隐性乳房炎特异性转移因子的制备及应用"省畜牧科技进步二等奖，证书号[2016]-20-05。 "水禽细小病毒ELISA的推广"省畜牧丰收奖二等奖，证书号HMF[2016]-20-03。 "羊场常见寄生虫的耐药性分析及综合防控措施的推广"省畜牧丰收奖二等奖，证书号HMF [2016]-18-16。 "秸秆生物发酵剂的研究与应用"省畜牧科技进步二等奖，证书号[2017]-10-08。"鹅副黏病毒病原特性研究及其防控技术"省畜牧科技进步二等奖，证书号[2017]-17-08。"乳房炎配套靶向治疗技术的推广"省畜牧丰收奖一等奖，证书号HMF[2017]-05-09。

黑龙江省兽医科学研究所

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