黄瓜籽为葫芦科植物黄瓜(Cucumis sativus L.)的种子《中华本草》中记载其具有续筋接骨，祛风，消痰的功效，主治骨折筋伤，风湿痹痛，老年痰喘等症，民间用于治疗骨质疏松症也具有悠久的应用历史。现代研究黄瓜籽中主要含有矿物质元素、脂肪酸、糖类、苷类和植物甾醇类成分，具有补钙、壮骨、抗疲有效组分对MC3T3-E1细胞骨形成相关的BMP-2、SPARC基因转录及蛋白表达具有上调作用劳等多种功效，可药食兼用而备受青睐。本项目通过体外药效学实验进行活性部位跟踪，在保证有效组分活性的前提下优化提取分离工艺，分离获得具有抗骨质疏松作用的黄瓜籽总黄酮类、总多糖类及总皂苷类活性组分。骨组织重建过程由成骨细胞和破骨细胞介导，成骨细胞增殖、分化及矿化，以去除旧的骨组织并产生新的骨组织而不断更新。通过MTT实验、胞外ALP活性实验、钙化结节形成实验，明确黄瓜籽中总黄酮、总多糖及总皂苷类活性成分能明显促进成骨细胞MC3T3-E1增殖、分化及矿化。骨形态形成蛋白Ⅱ（Bone Morphogenetic Protein-2,BMP-2）是一种具有潜在活性的蛋白质，BMP-2的诱导成骨作用主要表现在自身促进分化以及促进其它成骨因子的表达。SPARC也称为骨粘连蛋白，在骨形成过程中由成骨细胞分泌，在调节骨骼重塑以及维持骨量方面起着重要作用，在细胞外基质中，SPARC与胶原蛋白在骨骼中的沉积、矿物质结合及骨基质矿化密切相关。在骨的微环境中成骨细胞表达OPG/RANKL的相对比例对于破骨细胞的活性至关重要，并且上调该比例能够减少破骨细胞的分化及成熟，因而被认为是骨质疏松症治疗的一种策略。应用Real time- PCR及Western blot方法检测黄瓜籽有效组分对MC3T3-E1细胞骨形成相关的BMP-2、SPARC基因转录及蛋白表达具有上调作用，同时黄瓜籽有效组分对骨代谢相关的MC3T3-E1细胞OPG/RANKL蛋白表达及基因转录相对比例具有上调作用。研究发现黄瓜籽有效组分活性强度依次为：总黄酮类成分＞总多糖类成分＞总皂苷类成分。

黑龙江省中医药科学院

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