本项目系黑龙江省教育厅科技面上项目，胰腺癌早期诊断困难、恶性程度高、转移发生较早，而又缺乏有效的治疗手段，因此胰腺癌患者的五年生存率不足5%。由于现有疗法差强人意，因此更多的关注投向了胰腺癌的分子靶向治疗。EGCG是绿茶中最主要的茶多酚，具有多靶点、多阶段的抗癌作用，而且无明显的毒副作用，是一种优良的天然抗癌物质。近年来，国内外的学者对其抗癌机制进行了广泛的研究，但关于PTEN在EGCG对人胰腺癌PI3K/Akt/mTOR信号通路调控中所起作用的研究未见报道。 在前期研究中，我们在国际上首次发现了EGCG可以上调人胰腺癌细胞PTEN的表达，并以此为契机，提出了假说：EGCG通过上调PTEN的表达，进而高表达的PTEN抑制了磷酸化的Akt和mTOR的表达，最后起到调节PI3K/Akt/mTOR信号转导通路的作用。为了验证这一假说，本课题将通过人胰腺癌细胞系PANC-1和PANC-1细胞裸鼠移植瘤模型，采用MTT实验、RNA干扰、流式细胞术、TUNEL检测、RT-PCR、Western blot等手段，从分子、细胞和动物水平围绕以下目标进行研究：明确PTEN正常表达时EGCG对PI3K/Akt/mTOR通路相关蛋白表达的影响；明确PTEN表达抑制时EGCG对PI3K/Akt/mTOR通路相关蛋白表达的影响；明确EGCG对胰腺癌增殖、凋亡和PI3K/Akt/mTOR通路相关蛋白表达的调控作用与PTEN的关系；在PI3K/Akt/mTOR通路相关蛋白中发现EGCG新的作用靶点。结果显示EGCG可以抑制胰腺癌细胞增殖、诱导其凋亡，下调pAkt 和 p-mTOR表达的作用在PTEN沉默细胞有所减弱。 本研究将会有以下的意义：明确EGCG对胰腺癌PI3K/Akt/mTOR通路调节作用与PTEN的关系；在胰腺癌PI3K/Akt/mTOR通路及其相关蛋白中发现EGCG新的作用靶点；为其他以PTEN为靶点的抗胰腺癌药物的研究提供新的思路；为阐明EGCG抗胰腺癌的机制提供新的工作基础，也将为胰腺癌的分子靶向治疗提供新的视角；为EGCG治疗胰腺癌的临床应用提供理论支撑。 本研究有以下创新之处：本课题参考国内外关于EGCG抗胰腺癌机制的相关研究成果和EGCG对PI3K/Akt/mTOR信号转导通路作用的研究结果，结合我们自己的前期研究结果，凝练出科学问题并提出了自己的假说，因此本课题具有理论上的创新；近几年国内外学者的研究重点放在EGCG对肿瘤PI3K/Akt/mTOR信号通路的作用，而关于EGCG抗胰腺癌癌作用与PTEN和PI3K/Akt/mTOR 信号通路关系的研究鲜有报道。本课题以前期工作基础作为立项依据，将首次明确PTEN在EGCG调控胰腺癌PI3K/Akt/mTOR信号通路过程中所起的作用；本课题的先行研究中首次观察到EGCG对胰腺癌细胞PTEN的调控作用，进而将在PTEN正常表达和表达抑制的情况下探讨EGCG对PI3K/Akt/mTOR通路的调控机制。因此，本课题具有很强的创新性。 本研究的技术关键点和难点：EGCG对PI3K/Akt/mTOR通路相关蛋白表达的影响是直接的还是通过调控PTEN的表达来实现的？这是本项目拟解决的关键科学问题。本研究将采用RNA干扰手段沉默PTEN，通过人胰腺癌PANC-1细胞及其裸鼠移植瘤的研究来明确EGCG调控PI3K/Akt/mTOR通路相关蛋白表达的方式；在裸鼠移植瘤模型中如何有效抑制PTEN的表达? 这是拟解决的关键技术问题。本项目将建立ShRNA稳定转染细胞系PANC-S，进而用PANC-S细胞建立裸鼠移植瘤模型。我们在以往的研究中已用此法成功建立了肝肿瘤裸鼠移植瘤动物模型。 本研究将为阐明EGCG抗胰腺癌的机制提供新的工作基础，进而为EGCG治疗胰腺癌的临床应用提供理论支撑。

齐齐哈尔医学院

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