项目基本情况Basic information of the project
本研究采用立体定位法向PD模型大鼠纹状体内移植NSCs,以行为学检测初步探讨 NSCs移植对PD模型鼠的治疗情况。以机械分离法得到的 NSCs 平均存活率为 89.14%;刚分离的细胞呈圆形,体积较大,边界清楚,折光性强,细胞光滑无突起,接种后 3 天,可形成典型的神经球,大小不一;培养 6 天后传代,本实验已传至 2 代,传代后培养 6 天左右神经球再次达到 100-200 个细胞,神经球形成方式、形成时间及形态与原代培养相似,经 Nestin 鉴定呈阳性,证明神经干细胞具有增殖能力。NSCs 在分化培养基中培养36h,神经球周围伸出多个突起;培养 7 天后,相邻干细胞球迁出的细胞相互交联迁出的细胞从形态上看既有神经元,又有神经胶质细胞,经免疫细胞化学鉴定,分化的细胞有的呈 GFAP 阳性,为星形胶质细胞;有的呈 NSE 阳性,为神经元;此外,NSCs 还能分化为呈 TH 阳性的多巴胺神经元。说明 NSCs 具有分化潜能,在体外可以分化为多巴胺神经元,为 NSCs 脑内移植分化为多巴胺神经元治疗 PD提供依据。以 6-OHDA 纹状体内注射制作大鼠 PD 模型,术后 2 周经 APO 诱导,大鼠出现明显的旋转, 随后缓慢上升,至术后 5 周升至较高的水平并保持平稳,模型稳定,成功率达 62.1%;并且模型鼠在术后 8 个月经诱导,仍可发生旋转行为,为以后细胞移植治疗诸多神经退行性疾病提供可靠稳定的动物模型。在本实验中,将体外培养的 NSCs 向纹状体内移植后,经行为学检测,初步证明纹状体内移植 NSCs 可以改善 PD 症状。
管理团队与技术团队Management team and technical team
齐齐哈尔医学院
效益分析Benefit analysis
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