一、研究内容： 1、研究设计及受试者来源： 本研宄为对照研宄，受试者均来自黑龙江中医药大学附属第二医院研究期间脑卒中患者，本项研宄通过了黑龙江中医药大学附属第二医院伦理委员会审查并获得批准后实施。研究实施过程中必须紧遵自愿、知情同意的原则，在自愿、知情同意的基础上，严格依据纳入排除标准将受试对象分为治疗1组予针刺十三鬼穴联合头针丛刺治疗，治疗2组予头针丛刺联合常规针刺治疗，对照组予口服盐酸多奈哌齐片治疗。 2、统计： 治疗组、头穴组针刺每日一次，每周六次，对照组口服安理申5mg每日一次，治疗前、治疗4周、治疗8周，分别对患者进行血液采样，通过荧光定量PCR提取miRNAs，然后逆转录合成cDNA，利用实时荧光定量检测PCR（qRT-PCR）测定目标miRNAs的Ct值并进行统计分析，最终得出结论。 二、研究方法： 通过采集PSCI患者静脉血，提取血清，通过荧光定量PCR提取总miRNA，采用逆转录得到cDNA，在应用RT-qPCR扩增方法检测各组外周循环血中的相关microRNA表达水平的变化及相关性。 认知功能及日常生活能力评估分别于治疗前和治疗后，采用MoCA评分评估患者认知功能，采用日常生活活动能力量表（activities of daily living，ADL）评估生活能力。MoCA主要从视空间、执行能力、命名、记忆等8个维度共30个条目评估患者认知功能，总分30分，评分低于26分为认知功能障碍。ADL量表包含10个条目，总分100分，得分越高则日常生活能力越好。量表评估均由2名接受过统一培训的精神科医生进行，最终评分取平均值。 外周血miRNA-335表达水平测定分别于治疗前、治疗4周后和治疗8周后,采集患者外周静脉血3 mL，3000 r/min离心10 min后取上清液，采用Trizol法miRNA纯化试剂盒（美国 Biomiga公司）分离提取miRNA，使用752型紫外分光光度计RNA浓度及纯度，采用实时荧光定量检测PCR（qRT-PCR）miRNA-335Ct值。逆转录及PCR扩增试剂盒均购自日本TOYOBO公司,以 cel-miR-39为内参，具体操作严格按试剂盒说明书执行。 三、结果： 治疗1组总有效率高于治疗2组和对照组，差异具有统计学意义（P＜0.05）。治疗后，3组蒙特利尔认知量表（MoCA）评分及日常生活活动能力量表（ADL）评分均较同组治疗前升高（P＜0.05），且治疗1组均高于治疗2组和对照组（P＜0.05）。治疗4周及治疗8周后，3组患者外周血miRNA-335表达水平均较同组治疗前明显升高（P＜0.05)，且治疗1组明显高于治疗2组和对照组（P＜0.05）。 四、成果： 1、班维固,滕秀英,巩菲菲,陆丽娜,许文婷,齐辉.针刺十三鬼穴联合头针丛刺对卒中后认知障碍患者miRNA-335表达的影响[J].上海针灸杂志,2021,40(12):1395-1400.DOI:10.13460/j.issn.1005-0957.2021.12.1395. 2、班维固,滕秀英,齐辉.针灸疗法调控microRNA在基础实验中应用的研究进展[J].中医药导报,2021,27(07):138-142+147.DOI:10.13862/j.cnki.cn43-1446/r.2021.07.028.

黑龙江中医药大学

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