①课题来源与背景；黑龙江省自然科学基金（面上项目）。近年来，心肌缺血再灌注损伤（myocardialischemiareperfusion injury，MIRI）已成为冠状动脉内溶栓、冠脉搭桥以及介入治疗中常见的严重并发症，研究开发有效地防治心肌缺血性疾病的药物引起国内外的广泛关注。目前临床上治疗MIRI的主要药物有硝酸酯类、他汀类、Ca2+、血管紧张素转换酶抑制剂等，但长期服用均有一定副作用。近年来中药因其疗效稳定、毒副作用少、能作用于疾病多个环节等优点而受到广泛重视，探讨其在MIRI中的作用机制成为研究热点。目前认为其主要作用机制与清除氧自由基、减轻钙超载、改善能量代谢、干预炎症反应、调节血管内皮因子、抑制细胞凋亡等有关。因此，开发治疗心肌缺血再灌注损伤的多靶点药物对防治心脏疾病具有重大价值和意义。研究MIRI的分子机制并开发针对各种靶点的MIRI抑制剂，以此调控多种信号通路，为进一步明确MIRI分子机制及研发相关药物提供了新的思路。 ②技术原理及性能指标；芪桂益脉灵干预缺血再关注损伤模型，HE染色观察各组损伤部位的细胞形态，油红O染色检测斑块面积；免疫组化法检测各组大鼠心肌中炎症因子，细胞间粘附分子（ICAM-1）、环氧化酶-2（COX-2）、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）的表达；western-blot定性定量检测各组NF-κB（核内及核外p65、IκBα、p-IκBα）及其调控的炎症介质、MAPK（p38、p-p38、JNK、p-JNK、ERK1/2、p- ERK1/2）及其调控的炎症介质、Bcl-2及Bax的表达情况；Realtime-PCR法检测各组检测心肌PI-3Kp85amRNA、AKT2mRNA表达的测定，进行定量分析;采用膜片钳技术检测ATP敏感钾通道（KATP）开放情况。TUNEL检测各组细胞凋亡情况：末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口标记技术染色检测心肌细胞凋亡率。 ③技术的创造性与先进性；1、前期实验证实芪桂益脉灵对缺血再灌注心肌具有保护作用，炎症过程已成为预防和治疗冠心病的潜在靶点，中药复方制剂具有明确作用。2、缺血再灌注损伤存在预适应，中医中药产生预适应处理增强细胞分子修复功能或激发受体-PKC信号转导系统，能保护心脏抵抗急性缺血和再灌注损伤及其所致的心律失常，并为限制心肌梗死面积、降低心肌梗死后室颤阈和室颤发生率，提供了新思路和新途径。 ④技术的成熟程度，适用范围和安全性；心肌缺血再灌注损伤 ⑤应用情况及存在的问题(对促进相关学科的学术发展所做出的贡献) 1、前期实验证实芪桂益脉灵对缺血再灌注心肌具有保护作用，炎症过程已成为预防和治疗冠心病的潜在靶点，中药复方制剂具有明确作用。2、缺血再灌注损伤存在预适应，中医中药产生预适应处理增强细胞分子修复功能或激发受体-PKC信号转导系统，能保护心脏抵抗急性缺血和再灌注损伤及其所致的心律失常，并为限制心肌梗死面积、降低心肌梗死后室颤阈和室颤发生率，提供了新思路和新途径。3、研究并阐明芪桂益脉灵复方制剂通过NF-κB/MAPK途径、RISK信号通路，多靶点抑制心肌缺血再灌注损伤，调控分子信号通路修复机制，为研发中药复方以多通路、小分子靶点的抑制剂提供了理论和实验根据。

黑龙江中医药大学

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